即時(shí)檢測(Point-of-care technology,POCT)是指在接近病人治療處,由未接受臨床實(shí)驗(yàn)室學(xué)科訓(xùn)練的臨床人員或者病人自己進(jìn)行的臨床檢測。相比傳統(tǒng)的中心實(shí)驗(yàn)室檢測,即時(shí)檢測具有操作簡便、樣本用量少、樣本檢測周轉(zhuǎn)期短、檢測結(jié)果即時(shí)化等顯著優(yōu)勢,在重大疾病早期診斷、烈性傳染病快速篩查等領(lǐng)域有重大意義及廣泛需求。
先進(jìn)的微流體操控方法是實(shí)現(xiàn)即時(shí)檢測的重要環(huán)節(jié)。然而現(xiàn)階段的微流體操控方法大多基于毛細(xì)原理,存在操控功能單一、無法精確定量、穩(wěn)定性差等問題,在定性檢測的應(yīng)用中容易出現(xiàn)“假陰假陽”的問題,無法滿足世界衛(wèi)生組織(WHO)對于即時(shí)檢測的需求。
據(jù)麥姆斯咨詢報(bào)道,近期,Nature Communications期刊在線發(fā)表了西湖大學(xué)工學(xué)院姜漢卿團(tuán)隊(duì)的最新研究成果。該研究團(tuán)隊(duì)提出了一種全新的微流體操控方法(FAST)——同時(shí)具備微流體流動方向任意切換、流動快速、精確響應(yīng)、抵抗環(huán)境振動干擾、液體長時(shí)間存儲等特征,并將其應(yīng)用于流感病毒的核酸檢測中,操作人員只需添加樣本并等待82分鐘后即可得到檢測結(jié)果,真正實(shí)現(xiàn)了“樣本進(jìn)結(jié)果出”的即時(shí)檢測。
該微流體操控方法基于簡單的杠桿原理:在不通氣壓時(shí),杠桿通過彈性薄膜壓緊擋塊,將液體密封(圖1a);通入臨界氣壓后,薄膜膨脹將杠桿推開,擋塊與薄膜之間形成空隙,微流體可以通過空隙流入后面腔體(圖1b);撤掉氣壓后杠桿利用連接鉸鏈的彈性自動復(fù)位,重新將液體密封。通過調(diào)節(jié)杠桿的長度及杠桿支點(diǎn)位置等參數(shù),可以方便地對微流體流動臨界壓力進(jìn)行調(diào)節(jié)(圖1c、d)。
圖1 FAST原理示意圖
杠桿開啟關(guān)閉視頻
基于上述原理,通過巧妙的設(shè)計(jì),科研團(tuán)隊(duì)實(shí)現(xiàn)了:
1)微流體串行、并行、順序及選擇性流動狀態(tài)任意切換(圖2a);流動快速、精確響應(yīng)(圖2d);抵抗環(huán)境振動干擾,在150rad/min的振動下仍然不發(fā)生泄露(圖2c)。
2)液體長時(shí)間存儲,兩年存儲后僅產(chǎn)生0.3%的質(zhì)量損失(圖2b)。
3)適應(yīng)不同浸潤性及黏度液體的操控,可實(shí)現(xiàn)對高達(dá)5500cp黏度液體的精確操控。
圖2 FAST器件功能表征
將上述基本功能單元進(jìn)行集成設(shè)計(jì),科研團(tuán)隊(duì)研制了一種集液體存儲、自動進(jìn)樣、快速混合及多標(biāo)志物聯(lián)檢的即時(shí)檢測器件。利用該器件完成了甲型及乙型流感單一病毒的核酸檢測,最低檢出限可達(dá)102copies/ml,并實(shí)現(xiàn)了兩種流感病毒的分型檢測(圖3)。
圖3 甲乙流病毒核酸檢測結(jié)果
最后,研究人員利用FAST技術(shù)對36名志愿者進(jìn)行了流感病毒的核酸檢測,并與常規(guī)的手工核酸檢測方法進(jìn)行了對比。檢測結(jié)果表明,F(xiàn)AST技術(shù)對臨床樣本的檢測結(jié)果與常規(guī)方法相當(dāng)(Pearson, r=0.90), 并且FAST技術(shù)僅需82分鐘即可得到檢測結(jié)果,整個(gè)檢測過程無需人工干預(yù),而傳統(tǒng)方法需要140分鐘,且需要手工完成加樣、混合、樣本轉(zhuǎn)移等操作(圖4)。
圖4 臨床樣本檢測結(jié)果
盡管為實(shí)現(xiàn)即時(shí)檢測出現(xiàn)了多種微流體操控技術(shù),如離心操控技術(shù)、離心—?dú)鈩勇?lián)合操控技術(shù)等,然而同時(shí)具備微流體流動方向任意切換、流動快速、精確響應(yīng)、抵抗環(huán)境振動干擾、液體長時(shí)間存儲等特征的微流控技術(shù)仍鮮有報(bào)道。這或許就解釋了為何雖然出現(xiàn)了多種即時(shí)檢測產(chǎn)品(如Cepheid、Binx、Visby、Cobas Liat、Rhonda等),但其性能仍無法滿足市場需求。這三年新型冠狀病毒肺炎的肆虐也對即時(shí)檢測提出了更高的要求。該研究中的FAST技術(shù)不僅同時(shí)滿足上述所有特性,可以真正實(shí)現(xiàn)即時(shí)檢測,還可以應(yīng)用于環(huán)境監(jiān)測、食品安全檢測、材料合成及制藥等多種領(lǐng)域。
西湖大學(xué)工學(xué)院姜漢卿教授為本文的通訊作者。西湖大學(xué)姜漢卿實(shí)驗(yàn)室助理研究員梁超博士為本文的第一作者,第二作者楊子航目前團(tuán)隊(duì)的科研助理。本研究獲得了西湖大學(xué)的相關(guān)經(jīng)費(fèi)支持。
論文鏈接: https://doi.org/10.1038/s41467-022-32676-4
審核編輯 :李倩
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原文標(biāo)題:基于薄膜杠桿驅(qū)動開關(guān)的微流體操控方法,實(shí)現(xiàn)“樣本進(jìn)結(jié)果出”的即時(shí)檢測
文章出處:【微信號:Micro-Fluidics,微信公眾號:微流控】歡迎添加關(guān)注!文章轉(zhuǎn)載請注明出處。
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