CDPro技術(shù)可實(shí)現(xiàn)微量血液中蛋白的超靈敏檢測(cè)

通過(guò)檢測(cè)識(shí)別血液中生物標(biāo)志物來(lái)篩查早期人類(lèi)疾病是生命健康領(lǐng)域備受關(guān)注的重要研究方向之一。 當(dāng)前，臨床上常用的經(jīng)典分析技術(shù)，如酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA），由于檢測(cè)靈敏度的限制通常很難檢測(cè)到低豐度蛋白質(zhì)生物標(biāo)志物；而近些年來(lái)興起的數(shù)字蛋白檢測(cè)方法（digital ELISA）雖然能夠有效檢測(cè)到飛摩爾濃度級(jí)別的蛋白，但是，該項(xiàng)技術(shù)的實(shí)施通常涉及到專(zhuān)業(yè)昂貴的大型儀器，多個(gè)洗滌步驟，并且缺乏并行化處理樣本的能力，這些因素阻礙了其廣泛應(yīng)用。

近日，浙江大學(xué)良渚實(shí)驗(yàn)室王永成研究員團(tuán)隊(duì)開(kāi)發(fā)了新一代離心生成液滴的數(shù)字蛋白檢測(cè)技術(shù)（CDPro），基于微通道陣列的微流控芯片，利用常規(guī)的離心機(jī)即能實(shí)現(xiàn)對(duì)多達(dá)數(shù)百個(gè)樣本同時(shí)快速液滴生成，同時(shí)實(shí)現(xiàn)微量血液中蛋白的超靈敏檢測(cè)。

該成果以“Highly Parallel, Wash-free, and Ultrasensitive Centrifugal Droplet Digital Protein Detection in Sub-Microliter Blood”為題，發(fā)表在英國(guó)皇家化學(xué)會(huì)期刊Lab on a Chip上，并入選為熱點(diǎn)文章（HOT Articles）。

圖1 離心液滴數(shù)字蛋白質(zhì)檢測(cè)（CDPro）流程示意圖
研究團(tuán)隊(duì)開(kāi)發(fā)了新一代離心生成液滴的微流控芯片，在此基礎(chǔ)上開(kāi)發(fā)了基于液滴的數(shù)字免疫PCR技術(shù)，即通過(guò)一對(duì)特異性抗體-寡核苷酸（antibody-oligo）捕獲靶標(biāo)蛋白，繼而在DNA連接酶的作用下，將靶標(biāo)蛋白檢測(cè)信號(hào)轉(zhuǎn)化為核酸檢測(cè)信號(hào)。結(jié)合離心式液滴微流控芯片和數(shù)字免疫PCR技術(shù)，實(shí)現(xiàn)針對(duì)微量血漿中特定蛋白標(biāo)志物的飛摩爾靈敏度檢測(cè)極限。

綜上所述，CDPro技術(shù)不僅具備超高的檢測(cè)靈敏度和檢測(cè)準(zhǔn)確性，而且擁有樣品處理通量高、操作過(guò)程簡(jiǎn)單、免清洗、用血量少、成本低等特點(diǎn)及優(yōu)勢(shì)，能夠提供給普通生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行科學(xué)研究，以及臨床上血漿中低豐度蛋白檢測(cè)分析。

責(zé)任編輯：彭菁