微流控電阻抗技術(shù)檢測(cè)蜜蜂孢子

倘若地球上的蜜蜂消失了，人類(lèi)或要消失？這句話(huà)不是小編說(shuō)的，是下圖這個(gè)老頭兒說(shuō)的。小編也絕沒(méi)有要危言聳聽(tīng)的意思。

這個(gè)老頭兒在他的絕密手記上是這么說(shuō)的：人類(lèi)有可能在2060年滅絕；倘若地球上的蜜蜂全部消失了，人類(lèi)或許也要消失了，甚至有可能只剩下不到4年的時(shí)間。

好吧，說(shuō)什么我都不相信他說(shuō)的2060年人類(lèi)就滅絕的事情。不過(guò)認(rèn)真地說(shuō)，如果沒(méi)有蜜蜂授粉，地球上的萬(wàn)物應(yīng)該都會(huì)受到影響吧。難道要靠蒼蠅么？

內(nèi)生孢子又稱(chēng)芽孢，主要來(lái)源于寄生在昆蟲(chóng)的消化道上皮細(xì)胞中的微孢子蟲(chóng)，典型的有蜜蜂腸道微孢子蟲(chóng)和家蠶微孢子蟲(chóng)。微孢子蟲(chóng)病感染傳播速度快，易出現(xiàn)群體體質(zhì)衰弱甚至死亡，因此需要對(duì)昆蟲(chóng)腸道中的內(nèi)生孢子進(jìn)行檢測(cè)，以達(dá)到對(duì)微孢子蟲(chóng)病的防控和判斷最佳治療期。

目前，實(shí)驗(yàn)室對(duì)于蜜蜂腸道內(nèi)生孢子的計(jì)數(shù)只能通過(guò)顯微鏡計(jì)數(shù)，其過(guò)程費(fèi)時(shí)費(fèi)力，且蜜蜂腸道內(nèi)生孢子粒徑較小，僅2~3μm，不同人員間鏡檢結(jié)果偏差較大，且濃度偏高時(shí)鏡檢尤其困難。卓微科技定制版JIMBIO CL 細(xì)胞計(jì)數(shù)儀可替代顯微鏡鏡檢，檢測(cè)濃度范圍為1e5~5e6，能夠提高計(jì)數(shù)效率，給出準(zhǔn)確客觀的計(jì)數(shù)結(jié)果。

下面是整個(gè)蜜蜂腸道內(nèi)生孢子的計(jì)數(shù)案例

材料：感染微孢子蟲(chóng)病蜜蜂 、PBS（1X）

孢子懸液純化制備：1、取蜜蜂的腹部，置于放入蒸餾水及研磨粉的研缽中研磨。2、研磨均勻后轉(zhuǎn)入10ml離心管中，500rpm低速離心3min。3、上清轉(zhuǎn)入新的10ml離心管，棄沉淀，2000rpm高速離心10min。4、棄上清，用清水重新懸浮沉淀，4000rpm離心10min。5、取沉淀，用1mlPBS溶解沉淀，4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

顯微鏡鏡檢圖：

結(jié)果與分析：

從圖1、圖2可以看出，蜜蜂腸道內(nèi)生孢子比較小，且濃度較高的時(shí)候，樣本平鋪在血球計(jì)數(shù)板上非常密集，顯微鏡下計(jì)數(shù)困難。

從表1中可以看出，定制版JIMBIO-CL測(cè)試結(jié)果與計(jì)數(shù)板統(tǒng)計(jì)相比，平均濃度基本一致，由于定制版JIMBIO-CL為10微升樣本全計(jì)數(shù)，測(cè)試結(jié)果波動(dòng)較小，穩(wěn)定性明顯優(yōu)于進(jìn)口血球計(jì)數(shù)板。

注意事項(xiàng)：1、只能使用PBS（1X）稀釋待測(cè)蜜蜂孢子樣本；2、加樣前需充分混勻待測(cè)樣本（可根據(jù)樣本總量選擇不同規(guī)格液槍吹打）；3、為保證檢測(cè)結(jié)果的穩(wěn)定性，待檢測(cè)樣本總量不要低于100微升。