生物技術(shù)之激光轉(zhuǎn)染技術(shù)解析

　　細(xì)胞生物學(xué)家往往需要將外源分子送入細(xì)胞進(jìn)行研究，比如質(zhì)粒DNA或siRNA?；瘜W(xué)試劑、電穿孔和病毒遞送系統(tǒng)是目前最常用的三種途徑。

　　遞送方法的選擇主要取決于目標(biāo)細(xì)胞的類(lèi)型，需要遞送的分子，以及研究所需的轉(zhuǎn)染效率?！叭藗冇玫米疃嗟氖亲詈?jiǎn)單的方法——化學(xué)轉(zhuǎn)染，”Mirus+Bio公司的Josh+Snow說(shuō)。

　　化學(xué)轉(zhuǎn)染試劑旨在減少細(xì)胞對(duì)核酸的排斥（二者都帶負(fù)電荷），促使細(xì)胞膜通過(guò)胞吞、胞飲或融合攝入外源物質(zhì)。對(duì)于容易培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染的細(xì)胞系來(lái)說(shuō)，傳統(tǒng)的化學(xué)和物理轉(zhuǎn)染（如電穿孔）就已經(jīng)足夠了。不過(guò)化學(xué)試劑往往對(duì)細(xì)胞有毒，轉(zhuǎn)染原代細(xì)胞、干細(xì)胞或者其他難轉(zhuǎn)染細(xì)胞的效率也比較低。雖然病毒遞送對(duì)許多細(xì)胞類(lèi)型的效率很高，但使用起來(lái)比較麻煩，還需要采取特殊的防護(hù)措施，對(duì)操作者的專(zhuān)業(yè)要求也比較高。

　　除此之外，人們還在探索全新的轉(zhuǎn)染方法。這篇文章，特別對(duì)激光轉(zhuǎn)染方式、轉(zhuǎn)染產(chǎn)品和方法進(jìn)行了詳細(xì)的介紹。

　　GNOME（金納米顆粒介導(dǎo)的激光轉(zhuǎn)染）

　　Leibniz+University+Hannover%2C+Germany

　　GNOME轉(zhuǎn)染方案主要是通過(guò)短脈沖激光，在細(xì)胞膜上刺出微小的孔洞，使細(xì)胞外的分子能夠擴(kuò)散進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)。研究者們嘗試這一策略給細(xì)胞遞送分子已經(jīng)有十多年了，但傳統(tǒng)方案的速度非常慢通量也很低。

　　Dag+Heinemann及其同事首先將細(xì)胞與直徑約200+nm的金納米顆粒共同孵育，讓它們慢慢沉積到細(xì)胞上。三個(gè)小時(shí)之后，研究者們用短脈沖的綠色激光束照射樣本。這一過(guò)程在研究者自制的自動(dòng)化設(shè)備中進(jìn)行，該設(shè)備帶有能夠移動(dòng)培養(yǎng)皿的自動(dòng)載物臺(tái)和軟件，以便快速照射樣本。